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Title: Evaluación del efecto matriz en un ensayo ELISA competitivo usando muestras clínicas para la detección del biomarcador Ag38kDa de tuberculosis
Authors: Galeano Naranjo, Carolina
Adviser: Marín Muñoz, Paula Andrea
Keywords : Ensayo ELISA
Biomarcador Ag38kDa
Tuberculosis
Issue Date: 2018
Publisher: Universidad EIA
Abstract: Luego, se evaluó el efecto matriz de muestras de esputo sobre la curva de calibración competitiva estándar encontrada anteriormente. Para esto se realizó la dilución de muestras de esputo negativo para Tb, en tampón fosfato salino con tween al 0,05% (PBST) como el solvente estándar del ensayo competitivo. Dichas muestras diluidas fueron contaminadas con las concentraciones conocidas del Ag38kDa para realizar la competición con los inmunoreactivos establecidos a las concentraciones (0.03 g/mL – 0.012 g/mL). Usando las diferentes diluciones de muestras de esputo como solventes de las curvas de calibración se evaluó como afecta la matriz de la que se componen estas muestras, a los parámetros analíticos de la curva de calibración previamente hallada. De este ensayo de efecto matriz se obtuvo que, el cambio parcial o total del solvente estándar por esputo genera una reducción de la señal proporcional a la cantidad de esputo que se utilice como solvente, es decir, que mientras más esputo sea utilizado mayor será la caída de la señal. Por otra parte, los resultados mostraron que una dilución adecuada de muestras de esputo en PBST de 1:100 puede ser usada para la detección del Ag38kDa con anticuerpo anti38kDa (Myc31) en estas muestras, sin afectar las características analíticas del ensayo, debido a que esta dilución presentó una pérdida mínima de la señal máxima y aumentó la sensibilidad de la prueba, en comparación a las demás proporciones de esputo incluso a la curva estándar en PBST.
Abstract (English): Tuberculosis (Tb reminds being one of the main causes of death worldwide ranking above VIH/AIDS, just in 2016 more than 1.3 million people died due to TB. This cases are in part result of several factors; I) there are large gaps in detection and treatment, which increases the risk of spreading the infectious agent, II) lack of early diagnosis for patients with multidrug-resistant TB, III) delays in results of conventional methods for diagnosis and IV) people that do not have access to medical services so they can’t have treatment. Therefore, creating innovative methods for a fast and precise diagnosis is still one of the strategies in order to minimize deaths and prevent spread of the disease. As an answer to all of these challenges, biosensors appeared as a new technology in development that highlight as a result of their simplicity, portability and speed. These devices can be used for detection of important TB biomarkers as Ag38kDa. One of the fundamental stages of development of immunosensors for the detection of Mycobacterium tuberculosis (Mtb) is the validation of these devices in standard and clinical conditions with other techniques, as ELISA. Therefore, in this project we evaluate the matrix-induced effect caused with the clinical samples to the calibration standard curve of a competitive ELISA for the detection of Ag38kDa. The results would be used later on as a reference for the clinic validation of the piezoelectric immunosensor.
Description: 77 páginas
URI: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/2168
Citation: Galeano Naranjo, C. (2018) Evaluación del efecto matriz en un ensayo ELISA competitivo usando muestras clínicas para la detección del biomarcador Ag38kDa de tuberculosis (Trabajo de grado). Recuperado de: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/2168
Autorization: openAccess
Location: BIOM/0296
Appears in Collections:Ingeniería Biomédica

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