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Title: Obtención y diferenciación osteogénica de células madre de la bolsa de bichat
Authors: Ceballos Santa, María Camila
Adviser: Londoño Peláez, Carolina
Keywords : Célula madre
Bolsa de Bichat
Diferenciación celular
Caracterización histológica
Regeneración osteogénica
Stem cell
Buccal fat pad
Cell differentiation
Histological characterization
Osteogenic regeneration
Issue Date: 2019
Publisher: Universidad EIA
Abstract: A lo largo de las últimas décadas se ha optado por el uso y la aplicación de células madre en terapias de medicina moderna para tratamientos de diferentes enfermedades. Para ello, los esfuerzos investigativos se enfocan en el aislamiento de las células madre adultas, ya que están presentes en múltiples tejidos, forman parte del proceso natural de regeneración y han demostrado su multipotencialidad para diferenciarse a diversas líneas celulares especializadas al ser cultivadas in vitro. Los avances más recientes se han concentrado en identificarlas de la bolsa de Bichat, una masa adiposa encapsulada ubicada en la cavidad oral y de fácil acceso en cirugías maxilofaciales. Dichos estudios sostienen que esta fuente contiene células madre mesenquimales, las cuales se caracterizan por su capacidad de diferenciación a osteocitos, adipocitos, condrocitos y miocitos, como también a células de origen neural, hepático y renal. Por otra parte, afirman que además poseen la capacidad de autorenovarse con una alta tasa de proliferación. Con base en estos estudios previos y con el fin de analizar el comportamiento morfológico y la capacidad de proliferación bajo parámetros controlados, se aislaron células madre del tejido adiposo de las bolsas de Bichat y se preservaron en el tiempo hasta lograr una alta confluencia del cultivo. Adicionalmente, se evaluó la viabilidad celular por medio de los ensayos MTT y azul de tripano posterior a una criopreservación en nitrógeno líquido, tanto en estos cultivos como en los controles que no experimentaron las condiciones extremas de temperatura. Finalmente, las células fueron inducidas a diferenciación osteogénica y se detectó el inicio de la osteogénesis mediante una detección temprana de depósitos de calcio, los cuales fueron caracterizados de manera cualitativa con la tinción de alizarina roja.
Abstract (English): Throughout the last decades, the use and application of stem cells in modern medicine therapies has been chosen for the treatment of different diseases. To this end, the research efforts focus on the isolation of adult stem cells, since they are present in multiple tissues, are part of the natural regeneration process and have demonstrated their multipotentiality to differentiate into various specialized cell lines when grown in vitro. The most recent advances have focused on identifying them from the buccal fat pad, an encapsulated adipose mass located in the oral cavity and easily accessible in maxillofacial surgeries. These studies maintain that this source contains mesenchymal stem cells, which are characterized by their ability to differentiate into osteocytes, adipocytes, chondrocytes and myocytes, as well as cells of neural, hepatic and renal origin. On the other hand, they affirm that they also possess the capacity to self-renew with a high rate of proliferation. Based on these previous studies and in order to analyze the morphological behavior and proliferation capacity under controlled parameters, adipose tissue stem cells were isolated from the buccal fat pads and were preserved in time until a high confluence of the culture was achieved. Additionally, cell viability was evaluated by means of the MTT and trypan blue assays after a cryopreservation in liquid nitrogen, both in these cultures and in the controls that did not experience extreme temperature conditions. Finally, the cells were induced to osteogenic differentiation and the onset of osteogenesis was detected by an early detection of calcium deposits, which were qualitatively characterized by red alizarin staining.
Description: 61 páginas
URI: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/2337
Citation: Ceballos Santa, M.C. (2019). Obtención y diferenciación osteogénica de células madre de la bolsa de bichat (Trabajo de grado). Recuperado de: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/2337
Location: BIOM0312
Appears in Collections:Ingeniería Biomédica

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