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Title: Protocolo de obtención de células madre de limbo ocular en humanos
Authors: Salazar Piedrahita, Maria Belén
Adviser: Londoño Peláez, Carolina
Keywords : Células madre
Limbo ocular
Deficiencia limbar
Cultivo celular
Terapia celular
Medicina regenerativa
Stem cells
Corneal limbus
Limbal stem cell deficiency
Cell culture
Cell therapy
Issue Date: 2016
Publisher: Universidad EIA
Abstract: Las células madre del limbo ocular, que son las precursoras de la córnea, se encuentran en la unión entre la conjuntiva y la esclera y son fundamentales para el mantenimiento del epitelio corneal ante lesiones, mantienen la transparencia de la córnea, y participan en la homeóstasis ocular. En condiciones normales, una vez las células madre del limbo ocular son activadas, migran desde el limbo hacia el centro de la córnea y ayudan en la regeneración tisular. Entre las enfermedades oculares más comunes se encuentra la enfermedad o deficiencia limbar, una de las causas más importantes de la opacidad corneal, que puede conllevar a la disminución o pérdida de la visión. Estos pacientes no son candidatos para el trasplante de córnea convencional y si preexiste vascularización corneal e inflamación, el riesgo de rechazo en estos pacientes se incrementa. En pacientes adultos, son varios los factores que pueden llevar a la deficiencia limbar: lesiones inmunológicas, químicas, térmicas, o por rayos ultravioleta u otras radiaciones ionizantes. Dentro de las opciones terapéuticas, la terapia celular ha ganado popularidad en términos de reconstrucción de superficie ocular y de regeneración visual, minimizando el requerimiento de tejido donante y permitiendo la recolección de las células del propio paciente mediante procedimientos quirúrgicos mínimamente invasivos. Esta fuente presenta ventajas significativas para el tratamiento de enfermedades oculares debido a que son células autólogas, lo que disminuye el riesgo de rechazo por inmunidad. Con el objetivo de identificar una terapia celular para la enfermedad limbar se realizó esta investigación en la que se realiza la obtención y expansión de células epiteliales del limbo ocular. Se encontró que tanto la disgregación del tejido como el tiempo de crecimiento para lograr la adhesión son fundamentales para una expansión de las células. Los resultados, en correspondencia con los que muestra la literatura, mostraron que aproximadamente dos semanas después las células alcanzan un nivel de proliferación óptimo. La evaluación de los resultados fue visual, a través de microscopía óptica, y llevando registro fotográfico de los resultados. A partir de esto, y comparando con la literatura disponible se pudo reconocer la presencia de células madre pero se sugiere que para llevar más lejos esta investigación se realice una caracterización más detallada de los cultivos. Estos estudios potencian el descubrimiento y la posterior implementación de terapias celulares para controlar el desarrollo temprano de dichas enfermedades e incluso evitarlo.
Abstract (English): Limbal Stem Cells which are the precursors of the cornea, are located at the junction between the conjunctiva and sclera and have an essential role in maintaining the corneal epithelium when there is an injury. They maintain transparency of the cornea and participate in ocular homeostasis. Under normal conditions, once the ocular limbal stem cells are activated, they migrate from the limbus to the center of the cornea and help in tissue regeneration. Among the most common eye diseases there is the Limbal Stem Cell Deficiency, one of the most important causes of corneal opacity, which can lead to low or lost vision. Patients who suffer from this illness are not elegible for a conventional cornea transplant, given that they only present corneal transient amplifying cells which have a short life span; at the same time, the risk of transplant rejection increases if there is a preexistent corneal vascularization and/or inflammation. In adult patients, there are several factors that can lead to limbal deficiency: immunological, chemical or thermic injuries, ultraviolet rays or other ionizing radiations. Amongst the therapeutic options, cell therapy has gained popularity in terms of ocular surface reconstruction and visual regeneration, minimizing the requirement for donor tissue and allowing the collection of the patient's own cells with minimally invasive surgical procedures. This source has significant advantages for the treatment of eye diseases because they are autologous cells, reducing the risk of rejection immunity. Aiming to identify a suitable cell therapy for this disease, this research project was done by obtaining and expanding limbal epithelial cells. It was found that both the mincing of the tissue and the time of adhesion promotion of the explant to the surface are essential for cell expansion. The results, in accordance with the literature, showed that approximately after two weeks of culture the cells reach an optimal level of proliferation. The evaluation of the results was visual, through optical microscopy and photographic record of results. From this, and compared to the available literature, it was possible to recognize the presence of stem cells but it is strongly suggested to make a more detailed and strict characterization to take this research further. These studies enhance the discovery and subsequent implementation of cellular therapies to control the early development of these diseases and even prevent it.
Description: 55 páginas
URI: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/2013
Citation: Salazar Piedrahita, M.B. (2016) Protocolo de obtención de células madre de limbo ocular en humanos (Trabajo de grado). Recuperado de: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/2013
Autorization: openAccess
Location: BIOM00264
Appears in Collections:Ingeniería Biomédica

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