Please use this identifier to cite or link to this item: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/1999
Title: Evaluación de la proliferación de células madre de pulpa dental en matrices de pva y quitosano
Authors: Rivas Yepes, Laura
Adviser: Galvis Pareja, David Andrés
Keywords : Alcohol Polivinílico (PVA)
Quitosano
salt-leaching
Ingeniería de Tejidos
Células Madre de Pulpa Dental
Polyvinyl Alcohol (PVA)
Chitosan
Tissue Engineering
Dental Pulp Stem Cells
Issue Date: 2015
Publisher: Universidad EIA
Abstract: La ingeniería de tejidos plantea soluciones para reparar tejidos dañados. Una rama de esta, de creciente interés es la odontología regenerativa, cuyo reto es desarrollar matrices poliméricas que permitan procesos de adhesión, proliferación, migración y diferenciación de las células madre para su implementación en el campo de regeneración tisular. Este trabajo propone la fabricación de matrices de PVA-quitosano para evaluar de adhesión y proliferación en cultivo celular. Las matrices se fabricaron con una proporción 50:50 de PVA-Quitosano, por medio del método “salt-leaching” (uso de bicarbonato de amonio) y liofilización, buscando obtener condiciones adecuadas para el desarrollo célular in vitro. El tamaño de poro buscado estaba alrededor de los 200 μm. Se compararon las características entre matrices con la misma proporción sin usar agente porogénico, además de controles de 100% PVA y 100% quitosano, elaborados con las mismas características. Obteniendo un total de 6 tratamientos. Se realizaron las siguientes caracterizaciones: hinchamiento, pruebas mecánicas para evaluar resistencia a la compresión, microscopía electrónica de barrido (SEM), donde se observó microestructura y características de porosidad, espectrometría infrarroja por transformada de Fourier (FTIR) para determinación de grupos funcionales y la evaluación biológica en la matriz por medio del ensayo de MTT (Bromuro de 3-(4,5- dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol). La evaluación se realizó con células de ovario de hámster chino (CHO K1), porque esta línea celular posee una morfología fibroblastoide bastante parecida a la de las células madre de pulpa dental, es una línea estandarizada y reconocida; además de su fácil obtención. Finalmente se observó que las matrices 50/50 presentan poca porosidad, al igual que las de PVA, mientras que ambos tratamientos de las matrices con quitosano muestran un tamaño de poro alrededor de 200 μm. La resistencia a la compresión fue menor en las muestras con AP y en la matriz de quitosano sin AP. Además se obtuvo un porcentaje de hinchamiento mayor que sus controles sin AP. De manera cualitativa, por MTT, se logra observar adhesión celular en las matrices. Se sugiere aumentar el número de muestras, además de medir cualitativamente el MTT en cortes de la matriz.
Abstract (English): Tissue engineering seeks to find solutions to repair damaged organs. One area, of growing interest over the last years is regenerative dentistry, which has as one of its main challenges to develop scaffolds that enables the adhesion, proliferation, migration and differentiation processes on stem cells for its implementation on the tissue regeneration field. This work proposes the fabrication of Polyvinyl Alcohol (PVA)-Chitosan scaffolds for cellular culture evaluation. The scaffolds were built with a 50:50 proportion of PVA-Chitosan, using the salt-leaching method (using ammonium bicarbonate) and lyophilization, seeking to obtain adequate conditions for in vitro cellular development. The desired pore size was around 200 μm. The characteristics between scaffolds with the same proportion were compared without using a porogenic agent (PA), besides the 100% PVA and 100% Chitosan controls, made with the same characteristics. Obtaining in this way a total of 6 treatments. The following characterizations were made: Swelling, mechanical tests to evaluate compression resistances, Scanning Electron Microscopy (SEM), in which the microstructure and porosity characteristics were observed; Fourier transform infrared spectrometry (FTIR) in order to determine the functional groups and finally the biological evaluation using the MTT assay (3-(4, 5-dimethylthiazolyl-2)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). The evaluation was made with Chinese Hamster Ovary cells (CHOK1) because they have a fibroblast morphology similar to the dental pulp stem cells (DPSC), it is a standarized and recognized line and are easy to obtain. Finally, low porosity was observed in the 50/50 scaffolds, as well as with those with PVA, meanwhile both of the Chitosan treated matrices presented pores of around 200μm. The compression resistance was less in the samples with AP and in the Chitosan scaffold without PA. They also obtained a swelling percentage which was greater that their respective controls without PA. In a qualitative manner, using MTT, we can observe celullar adhesion in the scaffolds. It is suggested to increase the number of samples, and also to measure the MTT in scaffold cuts in a qualitative manner.
Description: 55 páginas
URI: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/1999
Citation: Rivas Yepes, L. (2015) Evaluación de la proliferación de células madre de pulpa dental en matrices de PVA quitosano (Trabajo de grado). Recuperado de: http://repository.eia.edu.co/handle/11190/1999
Autorization: openAccess
Location: BIOM00254
Appears in Collections:Ingeniería Biomédica

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
RivasLaura_2015_EvaluacionProliferacionCelulas.pdfTrabajo de grado6.16 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.