Examinando por Materia "Tissue Engineering"

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    PublicaciónAcceso abierto
    Evaluación de la proliferación de células madre de pulpa dental en matrices de pva y quitosano
    (Universidad EIA, 2015) Rivas Yepes, Laura; Galvis Pareja, David Andrés
    La ingeniería de tejidos plantea soluciones para reparar tejidos dañados. Una rama de esta, de creciente interés es la odontología regenerativa, cuyo reto es desarrollar matrices poliméricas que permitan procesos de adhesión, proliferación, migración y diferenciación de las células madre para su implementación en el campo de regeneración tisular. Este trabajo propone la fabricación de matrices de PVA-quitosano para evaluar de adhesión y proliferación en cultivo celular. Las matrices se fabricaron con una proporción 50:50 de PVA-Quitosano, por medio del método “salt-leaching” (uso de bicarbonato de amonio) y liofilización, buscando obtener condiciones adecuadas para el desarrollo célular in vitro. El tamaño de poro buscado estaba alrededor de los 200 μm. Se compararon las características entre matrices con la misma proporción sin usar agente porogénico, además de controles de 100% PVA y 100% quitosano, elaborados con las mismas características. Obteniendo un total de 6 tratamientos. Se realizaron las siguientes caracterizaciones: hinchamiento, pruebas mecánicas para evaluar resistencia a la compresión, microscopía electrónica de barrido (SEM), donde se observó microestructura y características de porosidad, espectrometría infrarroja por transformada de Fourier (FTIR) para determinación de grupos funcionales y la evaluación biológica en la matriz por medio del ensayo de MTT (Bromuro de 3-(4,5- dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol). La evaluación se realizó con células de ovario de hámster chino (CHO K1), porque esta línea celular posee una morfología fibroblastoide bastante parecida a la de las células madre de pulpa dental, es una línea estandarizada y reconocida; además de su fácil obtención. Finalmente se observó que las matrices 50/50 presentan poca porosidad, al igual que las de PVA, mientras que ambos tratamientos de las matrices con quitosano muestran un tamaño de poro alrededor de 200 μm. La resistencia a la compresión fue menor en las muestras con AP y en la matriz de quitosano sin AP. Además se obtuvo un porcentaje de hinchamiento mayor que sus controles sin AP. De manera cualitativa, por MTT, se logra observar adhesión celular en las matrices. Se sugiere aumentar el número de muestras, además de medir cualitativamente el MTT en cortes de la matriz.
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    PublicaciónAcceso abierto
    Fabricación de matrices de Quitosano y Alginato para su aplicación en ingeniería de tejidos
    (Universidad EIA, 2016) Salazar Puerta, Ana Isabel; Londoño López, Martha Elena
    Actualmente se ha trabajado en la ingeniería de tejidos con andamios (Scaffolds) biodegradables, que tienen la capacidad de imitar fielmente a la matriz extracelular (MEC) y así crear un ambiente propicio para la adhesión y proliferación celular, estimulando así el crecimiento de tejido in vitro (Yildirimer, Thanh, & Seifalian, 2012). En este trabajo se propone la fabricación de matrices porosas a partir de quitosano y alginato, dos polímeros de origen natural, para la posterior evaluación de la adhesión y proliferación de Fibrolastos en ellas. Las matrices se fabricaron con una concentración de quitosano al 1,5% y al 1%, manteniendo la concentración del alginato al 1%; se utilizaron además 2 proporciones: 75/25 y 25/75 de quitosano-alginato. Como agente porogénico se utilizó bicarbonato de amonio y de sodio entrecruzadas físicamente por medio de liofilización. Se realizaron 5 tratamientos con la combinación de los parámetros anteriores, otros 5 tratamientos a las mismas concentraciones y proporciones pero sin agente porogénico y 3 controles de 100% quitosano a una concentración del 1,5%, 1% y alginato al 1%. Se realizaron técnicas de caracterización a las matrices como: pruebas de hinchamiento, Microscopia Electrónica de Barrido (SEM) para determinar las características microestructurales y porosidad, Espectrometría Infrarroja por Transformada de Fourier (FTIR) para definir los grupos funcionales, Análisis de termogravimetría (TGA) y por último se realizó el cultivo de células de ovario de hámster chino (CHO) en las matrices y se caracterizó por medio de SEM nuevamente para evaluar su adhesión y proliferación. Finalmente se observó que las matrices que tenían una mayor proporción de quitosano presentaban un porcentaje de hinchamiento mayor, por lo cual su porosidad incrementó, tenía buena interconectividad y tamaño de poro adecuado. Además se pudo evidenciar la adhesión de células CHO en 4 de los 5 tratamientos planteados, presentando mejores resultados en las matrices con un alto contenido de quitosano.